aizy_cn 发表于 2011-7-6 13:41:31

大鼠阴道涂片及受孕的相关知识


1.关于SD大鼠的选择
性成熟期约为8周,体重240-280g左右(雌250g,雄300g)
最适交配时间:雄鼠,90日龄,约400g
雌鼠,80日龄,约300g
理论上性成熟后交配没有问题,但是考虑到成功率的高低,建议在最适时间交配。 尤其有资料指出雌鼠的体重过轻容易影响胎鼠的质量。
我们实验室雌鼠体重偏轻,约200-250g,但是受孕过程也很顺利,胎鼠也没有明显异常。

2.关于受孕前后的饲养
饲料:除常规大鼠饲料外,可添加瓜子和鸡蛋。瓜子是生的葵瓜子,不用去壳,它们很会剥;鸡蛋是白煮,老鼠尤其爱吃蛋黄。饮水中可添加维生素E。
合笼:傍晚合笼,次晨分笼,检查是否交配。

3.关于检查受孕与否的方式
1)有资料说雌鼠的阴道口随动情周期有所变化,但我想一般人难以分辨;
2)检查阴栓有很多人提到过,不过如果检查的时间迟了点,阴栓极有可能已脱落,反正我是一次没见到过;如果是有底铺垫料的鼠笼,估计也没人能找到脱落的阴栓。
3)阴道涂片,我想是最实用,成功率最高的了。下面会详细介绍...

涂片可以不用染色,基本能分辨。
1.动情间期/静止期

大部分为白细胞,混有少量较小的有核扁平上皮细胞


2.动情间期向动情前期发展

膨大的椭圆形的有核上皮细胞逐渐出现,增多


3.动情前期

大部分为膨大的椭圆形有核上皮细胞


4.动情期

膨大的上皮细胞核消失,成为鳞状脱落的角化上皮细胞,并聚堆,似落叶




6.动情后期

大部分白细胞,混有少量角化上皮细胞;
成功交配过的会看到大量精子细胞(头天下午5点合笼,次日中午12点才查的涂片,依旧能发现不少精子细胞),所以用此方法确定是否交配比较准确。


看阴道涂片的经验总结:
由于个人涂片的时间和技术不一样,老鼠的周期也不是每只都相同,而且周期之间是逐渐变化,没有明显界限,所以不容易看到典型周期的典型涂片。最好是每天做一到两次,观察变化的规律。
当白细胞的比例逐渐降低,有核上皮细胞,角化的鳞状上皮细胞越来越来多,持续2天(动情前期,动情期)接近满视野的时候,合笼多会发生交配。一旦角化的细胞变少,白细胞比例增多,说明已经开始进入动情后期,动情间期,如果没有合笼,或合笼后涂片中未发现精子,你多半只有再等待下一轮周期了。
有同学说如果动情间期持续3天以上,可能是已怀孕但是漏检了。我想还是蛮有道理的,不过漏掉精子并不容易。我有一次头天下午5点将其合笼,次日中午12点才查的涂片;而且那次不知什么原因笼底积水,第二天中午做涂片前我发现两大鼠还一直扒着笼沿站着,这样依旧能发现不少精子细胞,所以我想只要仔细观察,应该不会漏检掉精子.






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