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巨噬细胞培养

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发表于 2007-1-8 20:49:52 | 显示全部楼层 |阅读模式
我要做肺泡巨噬细胞培养方面的实验,: i! w+ D! ]' N5 T4 F! P, ~; {
可是在分离巨噬细胞时遇到了困难,
+ v8 p3 h0 N; i/ h4 Z9 e  \细胞在两天后全都死光光了.好心痛啊......& x/ Y' y3 y, W0 W
想请做过这方面实验的兄弟帮忙指点一二!+ Y  q3 V& ?/ z( w9 N
2 U! J; }$ Q" ?# v! C; H( e
. n) @, o! T# Z# H: J
不胜感激!
发表于 2007-1-8 20:59:21 | 显示全部楼层
 楼主| 发表于 2007-1-8 23:32:33 | 显示全部楼层
当时处死动物时,是个女生,估计是给整个动物弄到酒精里了,会不会呛到肺里?
8 C, u, `8 C' r因为我们的巨噬细胞是从肺泡灌洗液里提取的,如果酒精呛到肺里,会不会影响?7 x5 Y  [0 t* R9 D* D
还有,肺泡灌洗液体用的是生理盐水,离心的时候是1000g,5min,这些会不会有影响啊?
& S. {" r. n) E& B8 v6 s) z我也查了不少资料,说什么的都有,就是不知道改相信谁的了。
* R1 \2 b  d- O( ?6 u' a+ O想问问各位有做过巨噬细胞培养的大侠,交流一下,共同进步。
# S/ z' M4 s$ j! n3 N
发表于 2007-1-9 06:54:46 | 显示全部楼层

回复 #3 yuanfengtcm 的帖子

楼主讲的有可能,不过我没有做过这个真的还不敢给你瞎指挥,如果文献中各种做法都有的话,估计要自己摸索个条件了。
 楼主| 发表于 2007-1-9 10:55:22 | 显示全部楼层
有个病理学的教授(博士)告诉我们:巨噬细胞要三天时间才能贴壁。
: {( P7 y8 S, G2 ]2 z1 {我又怀疑是不是还没有贴壁就被冲洗掉了?但是当时明明看到有可多细胞的……
8 A0 `% p7 |; F6 a% M+ T# m; U: x4 t今天就培养够三天了,下午去看看,希望都能贴壁。
发表于 2007-1-10 07:40:36 | 显示全部楼层
祝愿你成功
 楼主| 发表于 2007-1-27 19:24:00 | 显示全部楼层
以前做了几次,都不成功.2 |2 ]: M3 b  Y& \  T
现在细胞成长的比较好了,但是又有了新的问题了:
) l1 h/ w" ]1 z不能把细胞从培养瓶上消化下来了.
/ Q4 L% @; @  A" o6 E# @不知道怎么回事,请各位指点.
发表于 2007-9-13 19:51:28 | 显示全部楼层
为什么不用现成的细胞系,如THP-1.
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