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4 Q/ L0 X1 K+ w4 e' l0 s1.关于SD大鼠的选择7 A* R( F0 y7 h3 R+ h6 p
性成熟期约为8周,体重240-280g左右(雌250g,雄300g)/ i% E1 D- E0 d, q6 i
最适交配时间:雄鼠,90日龄,约400g, O" A+ U; w' S/ s) K$ U
雌鼠,80日龄,约300g2 o9 p2 y% X% \0 u% A6 Q9 k1 i
理论上性成熟后交配没有问题,但是考虑到成功率的高低,建议在最适时间交配。 尤其有资料指出雌鼠的体重过轻容易影响胎鼠的质量。
+ j" N* m& C& X$ S1 U我们实验室雌鼠体重偏轻,约200-250g,但是受孕过程也很顺利,胎鼠也没有明显异常。
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o7 x2 r# J8 ~4 Z) S7 |2.关于受孕前后的饲养
+ E. d T8 g9 i/ m3 z! E* n0 m1 Z3 ~* R饲料:除常规大鼠饲料外,可添加瓜子和鸡蛋。瓜子是生的葵瓜子,不用去壳,它们很会剥;鸡蛋是白煮,老鼠尤其爱吃蛋黄。饮水中可添加维生素E。
7 V# |7 |& y! P% x5 ]" @3 V$ f8 D$ x合笼:傍晚合笼,次晨分笼,检查是否交配。" k s9 i, A; k: E
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3.关于检查受孕与否的方式
- \) M* K2 t( i' T: A, i% h, G1)有资料说雌鼠的阴道口随动情周期有所变化,但我想一般人难以分辨;
7 x G* y: \% v0 D" V* M* T2)检查阴栓有很多人提到过,不过如果检查的时间迟了点,阴栓极有可能已脱落,反正我是一次没见到过;如果是有底铺垫料的鼠笼,估计也没人能找到脱落的阴栓。( r/ Z6 O7 W3 C3 E; q% E
3)阴道涂片,我想是最实用,成功率最高的了。下面会详细介绍...
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涂片可以不用染色,基本能分辨。
/ M+ b4 Z* ~$ j: m4 D. _1.动情间期/静止期( {# H" P9 l5 ?0 a
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大部分为白细胞,混有少量较小的有核扁平上皮细胞
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* }8 }9 I1 {7 `! [6 [9 c2.动情间期向动情前期发展
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膨大的椭圆形的有核上皮细胞逐渐出现,增多 & x* h* H; j8 K
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5 W% ^% J/ \5 F9 m' S5 @3.动情前期
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2 r3 ~( J/ C: O& [$ h2 z4 n大部分为膨大的椭圆形有核上皮细胞
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& i7 J# k# W% G5 _; y5 z: @( h& l4.动情期& v- r; Q- j" L- n+ j6 Q
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膨大的上皮细胞核消失,成为鳞状脱落的角化上皮细胞,并聚堆,似落叶 ! x. t4 G) Z& m& o% s( j
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6.动情后期: d$ `( m$ p; a. d
5 Q# c' j+ a$ A2 `" |0 c大部分白细胞,混有少量角化上皮细胞;6 ~* H* }, y. ]! Z
成功交配过的会看到大量精子细胞(头天下午5点合笼,次日中午12点才查的涂片,依旧能发现不少精子细胞),所以用此方法确定是否交配比较准确。
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! k1 {6 s# |, x6 M" |& h4 A" c看阴道涂片的经验总结:& p5 t! s9 T* o5 i! ?
由于个人涂片的时间和技术不一样,老鼠的周期也不是每只都相同,而且周期之间是逐渐变化,没有明显界限,所以不容易看到典型周期的典型涂片。最好是每天做一到两次,观察变化的规律。, q6 O) Z1 ?8 T6 }- m
当白细胞的比例逐渐降低,有核上皮细胞,角化的鳞状上皮细胞越来越来多,持续2天(动情前期,动情期)接近满视野的时候,合笼多会发生交配。一旦角化的细胞变少,白细胞比例增多,说明已经开始进入动情后期,动情间期,如果没有合笼,或合笼后涂片中未发现精子,你多半只有再等待下一轮周期了。/ B' g/ X$ o8 `( F3 }" p& J
有同学说如果动情间期持续3天以上,可能是已怀孕但是漏检了。我想还是蛮有道理的,不过漏掉精子并不容易。我有一次头天下午5点将其合笼,次日中午12点才查的涂片;而且那次不知什么原因笼底积水,第二天中午做涂片前我发现两大鼠还一直扒着笼沿站着,这样依旧能发现不少精子细胞,所以我想只要仔细观察,应该不会漏检掉精子./ G( h" N3 N. ~* ^; Y
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