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1.关于SD大鼠的选择
$ B( N9 V; I$ S! R2 A性成熟期约为8周,体重240-280g左右(雌250g,雄300g)' z! Y7 a5 k8 Q- Z
最适交配时间:雄鼠,90日龄,约400g
% [* {) r+ _: V$ V- L( G7 M雌鼠,80日龄,约300g
4 e* T4 h! a0 [" p) q理论上性成熟后交配没有问题,但是考虑到成功率的高低,建议在最适时间交配。 尤其有资料指出雌鼠的体重过轻容易影响胎鼠的质量。1 g! f) \- ~) Y1 C
我们实验室雌鼠体重偏轻,约200-250g,但是受孕过程也很顺利,胎鼠也没有明显异常。& ~! D9 b3 T0 G# R( `* _2 z
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2.关于受孕前后的饲养8 [- F: ?% }: W- o3 {* S0 Z8 w
饲料:除常规大鼠饲料外,可添加瓜子和鸡蛋。瓜子是生的葵瓜子,不用去壳,它们很会剥;鸡蛋是白煮,老鼠尤其爱吃蛋黄。饮水中可添加维生素E。
3 j9 }& f% h# Z* G合笼:傍晚合笼,次晨分笼,检查是否交配。
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7 p) w5 d3 n& ~3.关于检查受孕与否的方式
1 T9 u+ w2 A" d* C# Q9 y1)有资料说雌鼠的阴道口随动情周期有所变化,但我想一般人难以分辨;: S! x% T- }" I* c
2)检查阴栓有很多人提到过,不过如果检查的时间迟了点,阴栓极有可能已脱落,反正我是一次没见到过;如果是有底铺垫料的鼠笼,估计也没人能找到脱落的阴栓。
: ^9 j# f& w) d9 R5 s3)阴道涂片,我想是最实用,成功率最高的了。下面会详细介绍...
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涂片可以不用染色,基本能分辨。
- }& z* ^- Q7 F6 t c! M7 S1.动情间期/静止期& @% C5 b. V( G, Y5 o/ u( k& ]0 S
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大部分为白细胞,混有少量较小的有核扁平上皮细胞
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0 j; {& H1 H: ^# ^2.动情间期向动情前期发展: {8 p, ^9 s/ s* g) ?
+ o6 ?4 Q6 ~* ~4 _ }膨大的椭圆形的有核上皮细胞逐渐出现,增多 , f s7 x$ u' k, ?
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! C& Z) ]) l2 y% J$ f: R3.动情前期; R& r- A8 E4 c6 l' }
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大部分为膨大的椭圆形有核上皮细胞
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8 R2 q, Y+ K, u) X g% ]7 ]4.动情期# p) g1 v+ G/ K/ |; X8 k
5 n& I" W0 Y: i# U4 ^( D膨大的上皮细胞核消失,成为鳞状脱落的角化上皮细胞,并聚堆,似落叶
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6.动情后期
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大部分白细胞,混有少量角化上皮细胞;
( `$ M h! D# T- l* k成功交配过的会看到大量精子细胞(头天下午5点合笼,次日中午12点才查的涂片,依旧能发现不少精子细胞),所以用此方法确定是否交配比较准确。 & S, r3 D6 r I* k' a( t- b
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) \' K9 `5 C2 a4 r" U1 g5 W- R看阴道涂片的经验总结:
& N: m! V# F) p由于个人涂片的时间和技术不一样,老鼠的周期也不是每只都相同,而且周期之间是逐渐变化,没有明显界限,所以不容易看到典型周期的典型涂片。最好是每天做一到两次,观察变化的规律。
# l' b1 [1 n0 j# J/ }( c当白细胞的比例逐渐降低,有核上皮细胞,角化的鳞状上皮细胞越来越来多,持续2天(动情前期,动情期)接近满视野的时候,合笼多会发生交配。一旦角化的细胞变少,白细胞比例增多,说明已经开始进入动情后期,动情间期,如果没有合笼,或合笼后涂片中未发现精子,你多半只有再等待下一轮周期了。+ x# G6 ^( l+ k* P# h) b! V
有同学说如果动情间期持续3天以上,可能是已怀孕但是漏检了。我想还是蛮有道理的,不过漏掉精子并不容易。我有一次头天下午5点将其合笼,次日中午12点才查的涂片;而且那次不知什么原因笼底积水,第二天中午做涂片前我发现两大鼠还一直扒着笼沿站着,这样依旧能发现不少精子细胞,所以我想只要仔细观察,应该不会漏检掉精子.
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