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巨噬细胞培养

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发表于 2007-1-8 20:49:52 | 显示全部楼层 |阅读模式
我要做肺泡巨噬细胞培养方面的实验,
; r' ~( H) R' Q4 `7 C可是在分离巨噬细胞时遇到了困难,; \0 y3 Z6 {' b& t
细胞在两天后全都死光光了.好心痛啊......
, d* N9 p! R5 N; A2 b, B4 `* T8 y* z3 S想请做过这方面实验的兄弟帮忙指点一二!+ ~7 O  g0 X; ]& @" @- v' u5 Y

$ e4 F: }3 u) \- Q0 C6 b
/ ]3 O% ^' Y- x: h8 m0 z不胜感激!
发表于 2007-1-8 20:59:21 | 显示全部楼层
 楼主| 发表于 2007-1-8 23:32:33 | 显示全部楼层
当时处死动物时,是个女生,估计是给整个动物弄到酒精里了,会不会呛到肺里?
: `$ c9 @8 `+ T& g1 z$ r  O因为我们的巨噬细胞是从肺泡灌洗液里提取的,如果酒精呛到肺里,会不会影响?
/ ]+ a% a2 O0 R' ]* b, V还有,肺泡灌洗液体用的是生理盐水,离心的时候是1000g,5min,这些会不会有影响啊?5 L+ Q9 X3 K. u: Y  k
我也查了不少资料,说什么的都有,就是不知道改相信谁的了。+ g$ ]" p+ b( r4 A7 d( w
想问问各位有做过巨噬细胞培养的大侠,交流一下,共同进步。
3 N! O/ `1 L# u2 e
发表于 2007-1-9 06:54:46 | 显示全部楼层

回复 #3 yuanfengtcm 的帖子

楼主讲的有可能,不过我没有做过这个真的还不敢给你瞎指挥,如果文献中各种做法都有的话,估计要自己摸索个条件了。
 楼主| 发表于 2007-1-9 10:55:22 | 显示全部楼层
有个病理学的教授(博士)告诉我们:巨噬细胞要三天时间才能贴壁。# f% }9 n- S3 V% `& n
我又怀疑是不是还没有贴壁就被冲洗掉了?但是当时明明看到有可多细胞的…… * }1 O' F5 f" g+ K' s. p0 {
今天就培养够三天了,下午去看看,希望都能贴壁。
发表于 2007-1-10 07:40:36 | 显示全部楼层
祝愿你成功
 楼主| 发表于 2007-1-27 19:24:00 | 显示全部楼层
以前做了几次,都不成功.( H& J& |, y- b2 o' d- z( x
现在细胞成长的比较好了,但是又有了新的问题了:
9 \# H8 H: A4 ]/ k不能把细胞从培养瓶上消化下来了.- P7 ^: u* L, r0 d8 ?" h: \; A
不知道怎么回事,请各位指点.
发表于 2007-9-13 19:51:28 | 显示全部楼层
为什么不用现成的细胞系,如THP-1.
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