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巨噬细胞培养

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发表于 2007-1-8 20:49:52 | 显示全部楼层 |阅读模式
我要做肺泡巨噬细胞培养方面的实验,
- U3 i4 D9 b3 ~1 U9 V" x% {可是在分离巨噬细胞时遇到了困难,: n* U* o" |9 l6 b' T% f4 o
细胞在两天后全都死光光了.好心痛啊......6 q9 \* o7 {$ ^4 f' M1 }! o
想请做过这方面实验的兄弟帮忙指点一二!% g" A: s0 w8 h, h

2 J7 W$ Z+ f  ^ + `3 V1 `; T$ d* o. F1 F2 M! V
不胜感激!
发表于 2007-1-8 20:59:21 | 显示全部楼层
 楼主| 发表于 2007-1-8 23:32:33 | 显示全部楼层
当时处死动物时,是个女生,估计是给整个动物弄到酒精里了,会不会呛到肺里?
) F9 Z" J5 r) i1 v. C因为我们的巨噬细胞是从肺泡灌洗液里提取的,如果酒精呛到肺里,会不会影响?2 {5 ~  R, J7 N' @2 T
还有,肺泡灌洗液体用的是生理盐水,离心的时候是1000g,5min,这些会不会有影响啊?$ i& Q$ G* f3 r8 b( D
我也查了不少资料,说什么的都有,就是不知道改相信谁的了。$ D) s( ~+ D4 y/ s7 ]1 x# P
想问问各位有做过巨噬细胞培养的大侠,交流一下,共同进步。
8 k" _: U' |5 b! x! ~4 r
发表于 2007-1-9 06:54:46 | 显示全部楼层

回复 #3 yuanfengtcm 的帖子

楼主讲的有可能,不过我没有做过这个真的还不敢给你瞎指挥,如果文献中各种做法都有的话,估计要自己摸索个条件了。
 楼主| 发表于 2007-1-9 10:55:22 | 显示全部楼层
有个病理学的教授(博士)告诉我们:巨噬细胞要三天时间才能贴壁。( f/ z" x$ |: {) Z5 r1 T
我又怀疑是不是还没有贴壁就被冲洗掉了?但是当时明明看到有可多细胞的……
# B4 L. [, r$ b: l3 q今天就培养够三天了,下午去看看,希望都能贴壁。
发表于 2007-1-10 07:40:36 | 显示全部楼层
祝愿你成功
 楼主| 发表于 2007-1-27 19:24:00 | 显示全部楼层
以前做了几次,都不成功.
! `; C+ R& F, G7 n" B现在细胞成长的比较好了,但是又有了新的问题了:
4 H& q( y: i7 R不能把细胞从培养瓶上消化下来了.; q. i7 J9 D- B* h, Z0 y& E* V- m8 d
不知道怎么回事,请各位指点.
发表于 2007-9-13 19:51:28 | 显示全部楼层
为什么不用现成的细胞系,如THP-1.
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