大鼠阴道涂片及受孕的相关知识

aizy_cn

1.关于SD大鼠的选择
, q4 U& m+ v- w( y性成熟期约为8周，体重240-280g左右（雌250g，雄300g）
4 ^( @$ d  v$ t! ~' z3 O& I最适交配时间：雄鼠，90日龄，约400g
* C) L, a& ~$ o7 y& O3 {雌鼠，80日龄，约300g
理论上性成熟后交配没有问题，但是考虑到成功率的高低，建议在最适时间交配。 尤其有资料指出雌鼠的体重过轻容易影响胎鼠的质量。
6 G0 `% q. ]- U8 T2 C' I我们实验室雌鼠体重偏轻，约200-250g，但是受孕过程也很顺利，胎鼠也没有明显异常。
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2.关于受孕前后的饲养
9 j) Q/ t" e/ z饲料：除常规大鼠饲料外，可添加瓜子和鸡蛋。瓜子是生的葵瓜子，不用去壳，它们很会剥；鸡蛋是白煮，老鼠尤其爱吃蛋黄。饮水中可添加维生素E。
合笼：傍晚合笼，次晨分笼，检查是否交配。
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3.关于检查受孕与否的方式
1）有资料说雌鼠的阴道口随动情周期有所变化，但我想一般人难以分辨；
+ K, [" i# e9 D# K2）检查阴栓有很多人提到过，不过如果检查的时间迟了点，阴栓极有可能已脱落，反正我是一次没见到过；如果是有底铺垫料的鼠笼，估计也没人能找到脱落的阴栓。
3）阴道涂片，我想是最实用，成功率最高的了。下面会详细介绍...

涂片可以不用染色，基本能分辨。
' S* K/ g! o9 Y! E" n4 C1.动情间期/静止期
% h7 X1 }- a5 W5 q: X
' Q3 v2 j5 G; d& W6 M; Q: i  Z5 R大部分为白细胞，混有少量较小的有核扁平上皮细胞
' X0 s6 D8 G, _8 C7 M5 R+ @' G
3 v9 Y- L& K; V( o6 a, I+ o
, K( u, Z# F4 l7 D6 Y! `2.动情间期向动情前期发展
" r8 W% V4 s$ J0 F' n$ n
/ E" B! G6 p/ H膨大的椭圆形的有核上皮细胞逐渐出现，增多


+ M/ \% H4 n4 t% v! v+ e; D3.动情前期
8 ^$ W1 J0 A* u
& `$ ^+ E( g; i" w) }0 L大部分为膨大的椭圆形有核上皮细胞
. w( {) W1 v2 |5 H

+ q! D( Z; W4 x- l3 ^$ _4.动情期
# v0 {) x: y! h+ d0 A: a
膨大的上皮细胞核消失，成为鳞状脱落的角化上皮细胞，并聚堆，似落叶

( s1 |+ R  w" S' x2 Q0 Z8 s


0 p" t6 X3 p- x5 a$ K6.动情后期

大部分白细胞，混有少量角化上皮细胞；
! ?) _/ c6 m9 B' Y成功交配过的会看到大量精子细胞（头天下午5点合笼，次日中午12点才查的涂片，依旧能发现不少精子细胞），所以用此方法确定是否交配比较准确。
5 X3 W: a8 c* ?6 _' I* E

% R6 J# A3 ^7 D- P0 Q) d看阴道涂片的经验总结：
由于个人涂片的时间和技术不一样，老鼠的周期也不是每只都相同，而且周期之间是逐渐变化，没有明显界限，所以不容易看到典型周期的典型涂片。最好是每天做一到两次，观察变化的规律。
当白细胞的比例逐渐降低，有核上皮细胞，角化的鳞状上皮细胞越来越来多，持续2天（动情前期，动情期）接近满视野的时候，合笼多会发生交配。一旦角化的细胞变少，白细胞比例增多，说明已经开始进入动情后期，动情间期，如果没有合笼，或合笼后涂片中未发现精子，你多半只有再等待下一轮周期了。
6 k6 h1 c* ~: e  F5 d有同学说如果动情间期持续3天以上，可能是已怀孕但是漏检了。我想还是蛮有道理的，不过漏掉精子并不容易。我有一次头天下午5点将其合笼，次日中午12点才查的涂片；而且那次不知什么原因笼底积水，第二天中午做涂片前我发现两大鼠还一直扒着笼沿站着，这样依旧能发现不少精子细胞，所以我想只要仔细观察，应该不会漏检掉精子.

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