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巨噬细胞培养

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发表于 2007-1-8 20:49:52 | 显示全部楼层 |阅读模式
我要做肺泡巨噬细胞培养方面的实验,
5 J2 f& [4 }0 j4 L% a3 b2 ?可是在分离巨噬细胞时遇到了困难,
( m9 O! Q6 m# s' C8 O细胞在两天后全都死光光了.好心痛啊......
* y3 h4 Q/ x) z& d' z/ Z想请做过这方面实验的兄弟帮忙指点一二!0 Z6 G$ {- c/ d$ b3 o
9 @% N  _8 v/ @4 l. Q

9 m: F6 b2 d- j' |! U4 H/ v不胜感激!
发表于 2007-1-8 20:59:21 | 显示全部楼层
 楼主| 发表于 2007-1-8 23:32:33 | 显示全部楼层
当时处死动物时,是个女生,估计是给整个动物弄到酒精里了,会不会呛到肺里?, n6 [: D# e; ]0 P6 F
因为我们的巨噬细胞是从肺泡灌洗液里提取的,如果酒精呛到肺里,会不会影响?
2 y5 ?2 g( u' A2 Q2 i% H还有,肺泡灌洗液体用的是生理盐水,离心的时候是1000g,5min,这些会不会有影响啊?2 b6 ?4 c. s( M% f- I$ X4 V
我也查了不少资料,说什么的都有,就是不知道改相信谁的了。
4 O/ p* o: x2 {想问问各位有做过巨噬细胞培养的大侠,交流一下,共同进步。 - x& ^8 v2 K  q8 p
发表于 2007-1-9 06:54:46 | 显示全部楼层

回复 #3 yuanfengtcm 的帖子

楼主讲的有可能,不过我没有做过这个真的还不敢给你瞎指挥,如果文献中各种做法都有的话,估计要自己摸索个条件了。
 楼主| 发表于 2007-1-9 10:55:22 | 显示全部楼层
有个病理学的教授(博士)告诉我们:巨噬细胞要三天时间才能贴壁。
- P7 u  N1 k' S0 D; X% T: r& [我又怀疑是不是还没有贴壁就被冲洗掉了?但是当时明明看到有可多细胞的……
. j' s% {0 T0 P今天就培养够三天了,下午去看看,希望都能贴壁。
发表于 2007-1-10 07:40:36 | 显示全部楼层
祝愿你成功
 楼主| 发表于 2007-1-27 19:24:00 | 显示全部楼层
以前做了几次,都不成功.
1 U. `6 I$ p) `8 F6 m2 ~现在细胞成长的比较好了,但是又有了新的问题了:3 h/ u1 d2 w5 |
不能把细胞从培养瓶上消化下来了.
3 U* W2 M9 Q0 w/ p  Q' I) ]+ G' u7 X不知道怎么回事,请各位指点.
发表于 2007-9-13 19:51:28 | 显示全部楼层
为什么不用现成的细胞系,如THP-1.
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