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巨噬细胞培养

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发表于 2007-1-8 20:49:52 | 显示全部楼层 |阅读模式
我要做肺泡巨噬细胞培养方面的实验,
0 X( M+ X$ K* r, }8 o  T可是在分离巨噬细胞时遇到了困难,
0 |! P8 P0 v! ^% h8 X" e& r细胞在两天后全都死光光了.好心痛啊......
% q& J' |( U+ r, G7 ~- O9 `: F想请做过这方面实验的兄弟帮忙指点一二!7 f. ]! `) l, d6 d  @4 h' m
# U8 o' k8 E3 w; d: B% {. a; p

+ z% [/ I: R* t不胜感激!
发表于 2007-1-8 20:59:21 | 显示全部楼层
 楼主| 发表于 2007-1-8 23:32:33 | 显示全部楼层
当时处死动物时,是个女生,估计是给整个动物弄到酒精里了,会不会呛到肺里?+ j5 `; v" r5 Y
因为我们的巨噬细胞是从肺泡灌洗液里提取的,如果酒精呛到肺里,会不会影响?
" @$ W( q: W8 k1 Y; I还有,肺泡灌洗液体用的是生理盐水,离心的时候是1000g,5min,这些会不会有影响啊?
5 `' F' X# ~/ U9 w8 f: {/ w我也查了不少资料,说什么的都有,就是不知道改相信谁的了。
* V8 y, {; z) F6 J8 T想问问各位有做过巨噬细胞培养的大侠,交流一下,共同进步。 7 p5 I; C! k! J4 f
发表于 2007-1-9 06:54:46 | 显示全部楼层

回复 #3 yuanfengtcm 的帖子

楼主讲的有可能,不过我没有做过这个真的还不敢给你瞎指挥,如果文献中各种做法都有的话,估计要自己摸索个条件了。
 楼主| 发表于 2007-1-9 10:55:22 | 显示全部楼层
有个病理学的教授(博士)告诉我们:巨噬细胞要三天时间才能贴壁。8 Z* L' t- r9 m* N3 U
我又怀疑是不是还没有贴壁就被冲洗掉了?但是当时明明看到有可多细胞的…… , X" T4 U1 b5 h* @+ D* t
今天就培养够三天了,下午去看看,希望都能贴壁。
发表于 2007-1-10 07:40:36 | 显示全部楼层
祝愿你成功
 楼主| 发表于 2007-1-27 19:24:00 | 显示全部楼层
以前做了几次,都不成功.3 L, z4 w; o$ F; i2 R
现在细胞成长的比较好了,但是又有了新的问题了:
, ]6 S+ J9 x& ?2 ]9 ?不能把细胞从培养瓶上消化下来了.
$ N7 s! g5 |7 o: f不知道怎么回事,请各位指点.
发表于 2007-9-13 19:51:28 | 显示全部楼层
为什么不用现成的细胞系,如THP-1.
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